生物必修１实验复习

第一：显微镜的使用

1.一般步骤：取镜安放→对光→放置玻片标本→低倍找物像→移中央→换高倍镜→调细准焦螺旋→高倍观察
2.调节视野亮度的方法：调节反光镜或光圈
3.放大倍数：目镜放大倍数乘以物镜放大倍数。放大的物体的长度或宽度即两点间的距离。
4.放大面积：用圆面积计算。
5.特点：成倒立的虚像。物象移动方向与载玻片移动方向相反
6.识别：物镜有螺纹，且镜头越长，放大倍数越大；目镜无螺纹，且镜头越长，放大倍数越小。
7.判断误物所在位置：分别移动载玻片、物镜和转动目镜，观察污物是否移动来判断。
8.物镜与载玻片距离：放大倍数越高，物镜距载玻片的距离越近。
9.视野大小与放大倍数的关系：放大倍数越大，视野里的细胞数目越少，视野越暗，反之亦然。

第二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

1.原理：化学试剂能使生物组织中的有关有机物产生特定的颜色反应。
还原性糖（葡萄糖、果糖）＋斐林试剂：砖红色沉淀
脂肪＋苏丹Ⅲ：橘黄色　　脂肪＋苏丹Ⅳ：红色
蛋白质＋双缩脲试剂：紫色反应（而非沉淀）
淀粉＋碘：蓝色（而非沉淀）
2.注意：
材料必须为白色或近白色
还原性糖与斐林试剂反应时，必须水浴加热
斐林试剂必须现配现用（甲液与乙液配好后加入）：同时加
双缩脲试剂的A液和B液先后加入。
蛋白质与双缩脲反应时不需加热。
斐林试剂：甲液　0.1g/mL的NaOH；乙液　0.05g/mL的CuSO4
双缩脲试剂：A液0.1g/mL的NaOH；B液0.01g/mL的CuSO4
检验是否含还原糖必须是现配的（以免非还原性糖因分解而产生还原性糖）
酒精的作用是洗去浮色。
脂肪的检测需要用到显微镜。
还原性糖鉴定的颜色变化：
淡蓝色（CuSO4）－棕色(Cu(OH)2)－砖红色(Cu2O)。
还原性糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖。

第三：观察DNA和RNA在细胞中的分布

1.原理：甲基绿与吡罗红混合染色，甲基绿使DNA呈绿色，吡罗红使RNA呈红色。
2.步骤：取口腔上皮细胞→制临时装片→烘干→盐酸水解→冲洗→染色→观察
3.注意：用生理盐水的目的：保持口腔上皮细胞形态
  烘干的目的：吸附住细胞
  加盐酸的目的：改变细胞膜通透性，加速染色剂进入细胞，使蛋白质与DNA分离。
  蒸馏水缓水冲洗的目的：洗去盐酸；缓水冲洗：防止细胞被水流冲走。
  保温的目的：有利于染色剂与DNA和RNA的结合。

第四：观察质壁分享及复原实验

1.原理：成熟植物细胞的原生质层相当于一层半透膜，细胞液具有的尝试，能够渗透失水或吸水。
2.实验步骤：撕取洋葱鳞片叶外表皮，制作临时装片→低倍找物像，并移中央→转换高倍镜→调细准焦螺旋→高倍观察（找到紫色大液泡，原生质层与细胞壁紧贴）→盖玻片一侧加0.3g/mL的蔗糖液，另一侧用吸水纸吸水（观察：液泡缩小，并产生原生质层与细胞壁的分离）→盖玻片一侧加清水，另一侧用吸水纸吸水（观察：液泡变大，原生质层与细胞壁贴近）。
3.注意：取紫色洋葱外表皮，不能取内表皮
  质壁分离的表现：由坚挺到萎蔫；液泡由大到小；细胞液颜色由浅到深；原生质层与细胞壁紧贴到分离。

第五：比较过氧化在不同条件下的分解

1.原理：催化剂能降低反应的活化能，Fe3+和过氧化氢酶能催化过氧化氢的分解。即：
2H2O2→2H2O+O2(有气泡产生)
2.实验变量：自变量：在实验中人为改变的变量
   因变量：随自变量变化的变量
   无关变量：除自变量外以外影响实验结果的其他变量
   检测方法：用以检测因变量发生量的手段
   本实验的自变量是：温度、加Fe3+和加过氧化氢酶，本实验的因变量是过氧化氢分解的多少，检测方法是气泡产生的多少或卫生香燃烧的剧烈程度。无关变量是加入各溶液的量、温度、ＰＨ值、时间长短等。
3.探究性实验设计的原则：保持单一变量和设置对照
4.注意：要选新鲜肝脏（细菌影响活性）
  肝脏要制成研磨液（接触面积）
  滴入肝脏研磨液与FeCl3溶液时不能用同一吸管（防止混合 影响实验效果）
  插入卫生香时不能碰触到气泡（以免使卫生香因潮湿而熄灭）

第六：酶催化特性的实验

1.高效性
（１）原理：酶的催化效率比无机催化剂要高
（２）变量分析：自变量：催化剂类型
    因变量：底物分解速度或产物形成速度
    无关变量：试剂量、温度、ＰＨ
    检测方法：气泡产生多少或卫生香燃烧剧烈程度
２.专一性
（１）原理：酶只能催化一种或一类化学反应的进行
（２）变量分析：自变量：不同的底物
    因变量：底物分解情况
    无关变量：试剂量、温度、ＰＨ
    检测方法：砖红色沉淀（用斐林试剂检测）
（３）思路：一组底物用淀粉，一组底物用蔗糖来验证淀粉酶的专一性。所以需要２支试管。

3.酶作用的条件
（１）温度对酶活性的影响
原理：不同温度条件下，酶的活性不同，因而催化效率即反应的速度不一样。
变量：自变量：不同的温度（可以设计几组不同的温度，如10、20、30、40等）
 因变量：底物分解速度或产物生成速度
 无关变量：酶浓度、试剂量、ＰＨ、底物浓度等
 检测方法：如用斐林试剂检测还原性糖的生成速度
（２）ＰＨ对酶活性的影响
原理：不同ＰＨ条件下，酶的活性不同，因而催化效率取反应的速度不一样。
变量：自变量：不同的ＰＨ（可以设计几组不同的ＰＨ：2、4、6、7、8、9等）
 因变量：底物分解速度或产物生成速度
 无关变量：酶浓度、试剂量、温度、底物浓度等
 检测方法：如用斐林试剂检测还原性糖的生成速度
注意：要设置对照实验（组）
  实验设计的一般步骤为：根据不同自变量和对照考虑所要设置的实验组数并进行编号→进行不同的处理（即按要求组成实验组）→平衡无关变量→观察现象并填写记录表→分析结果→得出结论
  控制各加入的药品的温度和ＰＨ值，目的是使反应一开始便达到预设温度或ＰＨ，以减少实验误差。

第七：探究酵母菌细胞呼吸方式

1.原理：酵母菌既能进行有氧呼吸也能进行无氧呼吸
2.变量：自变量：氧气的有无
  因变量：能否产生有氧呼吸或无氧呼吸（产生CO2多少或酒精的有无）
  检测方法：检测CO2：澄清石灰水（变混浊）或溴麝香草酚蓝水溶液（由蓝变绿再变黄）；检测酒精：酸性重铬酸钾（由橙色变灰绿色）。
  无关变量：试剂量、ＰＨ、温度等
3.注意：选新鲜食用酵母菌
  甲组10%NaOH可吸收通入空气中的CO2，乙组中的B瓶应先放置一段时间，让Ｏ２耗尽。
  装置应放在25-35度环境中，使酵母菌酶活性最高。
  石蜡油能隔绝空气。

第八：绿叶中色素的提取和分离

1.原理：色素能溶解在有机溶剂无水酒精中。各种色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之慢。
2.步骤：5g新鲜绿叶→研磨→过滤→收集→制备滤纸条（剪裁滤纸条→铅笔画细线）→画滤液细线（毛细吸管吸取滤液→沿铅笔线画细线→干后重复画1-2次）→层析（将画有滤液细线的滤纸条放入层析液中，等待）→观察四条色素带→洗手
3.注意：加无水酒精：溶解叶片中的色素
  加少许SiO2:使研磨更充分
  加少许CaCO3：保护色素
  加棉塞：防止液体挥发和色素被氧化
  干燥滤纸：使层析液的扩散更快
  滤纸剪去两角：防止层析液在滤纸条的边缘处扩散过快
  滤液细线要直细齐：使分离的色素带平整不重叠
  重复画滤注细线：增加色素的量，使色素带清晰
  滤液细线不能触及层析液：防止色素溶解到层析液中，观察不到色素带
  迅速充分研磨：防止溶剂挥发，充分溶解色素